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为什么大家都用荧光蛋白定位标记?用什么光源激发GFP荧光蛋白?

发布时间:2017-11-06 00:00:00      发布人:   浏览量:139

为什么大家都用荧光蛋白标记?用什么光源激发荧光蛋白?

1 易于检测,灵敏度高。

GFP荧光反应不需要外加底物和辅助因子,只需紫外光或蓝光激发,即可发出绿色荧光,用荧光显微镜甚至肉眼就可以观察到。其次,即便是未经纯化的

GFP发射的绿光也是相当强的,在正常室内光线下仍清晰可辨。对于单细胞水平的表达也可识别。

 gfp定位标记激发观察光源

2. 荧光性质稳定。

GFP对光漂白(一种荧光衰减现象)有较强的耐受性,能耐受长时间的光照,从而延长了可探测时间;GFPpH7~ 12范围内也能正常发光,

对高温(70 ℃)、碱性、除垢剂、盐、有机溶剂和大多数普通酶都有较强抗性。

 

3 对细胞无毒害。

从目前的研究结果来看,GFP对生活的细胞基本无毒害,与目的基因融合后,对目的基因的结构功能没有影响,转化后细胞仍可连续传代。

 gfp荧光蛋白激发光源

4. 构建载体方便。

由于编码GFP的基因序列很短,所以很方便地同其它序列一起构建多种质粒,而不至于使质粒过大影响转化频率。

 

可直接用于活细胞测定。

GFP 是能在异源细胞内表达后,能自发产生荧光的蛋白,并且GFP的分子量较小,N-端和C-端都能忍受蛋白的融合,是理想的标记物,可进行活细胞实时定位观察,更能接近自然真实的状态。如在活细胞中直接观察蛋白向细胞核、内质网运动的状态,还可实时观察到

外界信号刺激下,目的蛋白的变化过程,借助荧光显微镜观察,使研究更为方便。使用激光共聚焦显微镜,其图像效果更佳,结合现代的计算机软件,可进行三维显示。

 

6 不受假阳性干扰。

由于其他生物本身不含有GFP,因此不会出现假阳性结果,GFP作为分子探针可以代替荧光染料,避免由于染料扩散造成的定位不准,使结果真实可靠。

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7 广谱性。

表现在GFP的表达几乎不受种属范围的限制,在微生物、植物、动物中都获得了成功的表达,其次是GFP没有细胞种类和位置上的限制,在各个部位都可以表达发出荧光。

 

8 易于得到突变体。

GFP中氨基酸的替换可产生不同光谱特性的突变体,且增强了荧光强度,适合在不同物种中专性表达。

 

用什么光源激发荧光蛋白?

美国路阳LUYOR-3415荧光蛋白定位激发光源 

LUYOR-3415荧光蛋白定位激发光源可与荧光蛋白观察镜luv-50或 luv-60一起使用直接观察绿色荧光蛋白(GFP)或黄色荧光蛋白(YFP)。激发光源与观察眼镜LUV-50共同使用,可在动物设备的固定位置如消毒层流柜直接观察绿色荧光蛋白(GFP)。两个握杆之间的空间可容纳小动物的笼子(如小鼠)。LUYOR-3415激发光源使用110/220v,可与观察镜luv-50  luv-60一起使用直接观察绿色荧光蛋白(GFP)或黄色荧光蛋白(YFP)。

gfp定位标记激发光源


路阳GFP激发光源的典型用户:

1.中国农业大学

2.北京农业大学

3.南京农业大学

4.中山大学

5.中国农业科学院果树研究所

6.中国农业科学院水稻研究所

7.西北农林大学

8.华中农业大学

9.福建农林大学

10.山东农业大学。。。。。。

 LUYOR-3260便携式激发光源的介绍:

http://www.luyor.net/product/product166.html

 

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