GFP/RFP/BFP/YFP荧光蛋白用什么激发光源？

GFP/RFP/BFP/YFP荧光蛋白用什么激发光源？

GFP绿色荧光蛋白的发现为生物工程研究带来极大的便利，在GFP绿色荧光蛋白后，陆续又有了红色荧光蛋白RFP，蓝色荧光蛋白BFP，黄色荧光蛋白YFP……

绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein，GFP）来自维多利亚水母，是荧光蛋白中应用最多的一种。GFP可在508nm处自行发射绿色荧光，无需辅助因子和底物。将GFP基因插入质粒作为一种手段，可以达到许多功能目的。

红色荧光蛋白 (red fluorescent protein, RFP) 是一种荧光团，在激发时会发出红橙色荧光。人们利用定向诱变技术开发了几种变体。最初的变体是从Discosoma中分离出来的，名为DsRed。红色荧光蛋白RFP约为25.9kDa。现在，红色荧光蛋白还有其他变体，它们发出橙色、红色和远红色荧光。

黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于维多利亚多管水母（ Aequorea victoria）。相对于绿色荧光蛋白，其荧光向红色光谱偏移，而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其更大激发波长为514 nm，更大发射波长为527 nm。

在基因编辑研究中，我们常用激发光源激发荧光蛋白发出荧光做相应的标识或表达，那么这些常见的荧光蛋白激发光源是哪些呢？

选择正确的激发光源，首先得知道荧光蛋白在什么样的激发波长下会发出荧光，即激发波长。常见荧光蛋白激发波长如下：

1）红色荧光蛋白RFP：激发波长532nm（绿光）,发射波长588nm；

2）绿色荧光蛋白GFP：激发波长为 488 nm（蓝光或紫光）,发射波长507 nm；

3）蓝色荧光蛋白BFP: 激发波长在400nm（紫）左右，发射波长在450nm左右；

4）黄色荧光蛋白YFP: 最大激发波长为514 （绿光）nm，最大发射波长为527 nm。

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