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CY3染料的激发波长和发射波长是多少?

发布时间: 作者:上海路阳仪器 技术文档组 点击次数:
本篇摘要

CY3染料激发约550nm、发射约570nm,可用532nm激发,配LUV-50A红色观察眼镜;也可用LUYOR-3415双波长光源或LUYOR-3280GR荧光手电筒观察。

核心要点

  • CY3 吸收峰约 550nm,发射峰约 570nm,属橙红色荧光
  • 实际常用 532nm 激光或绿光波段激发
  • 观察配 LUV-50A 红色眼镜,滤掉激发光只留橙红发射
  • 可用 LUYOR-3415 双波长光源的绿光档激发
  • 也可用 LUYOR-3280GR 便携式荧光手电筒直接观察
  • CY3 光稳定性好、抗漂白、量子产率高,适合长时间成像

CY3 的吸收峰约 550nm、发射峰约 570nm,落在橙红色区域。实际观察常用 532nm 或绿光波段激发,配 LUV-50A 红色眼镜;便携方案可以用 LUYOR-3415 的绿光档或 LUYOR-3280GR 荧光手电筒。

有客户咨询:观察CY3染料该选哪个激发波长,下面是CY3染料的光谱图:

CY3染料的激发波长和发射波长是多少? 图1

CY3染料是532nm激发,可以用LUYOR-3415便携式双波长激发光源的滤光片去激发,用LUV-50A荧光观察眼镜观察荧光。或者用LUYOR-3280GR便携式荧光手电筒去观察。

CY3荧光染料介绍:

Cy3是一种常见的荧光染料,又被称为花青染料。它是一种具有高荧光强度的物质,可以在特定波长激发下发出美丽的色彩。Cy3具有高光稳定性、高抗光漂白性、荧光亮度高、红色光谱、溶于水和有机溶剂以及兼容性好等优点。

Cy3染料的分子结构中含有一个环己烷环和三个共轭环,这使得Cy3染料具有稳定的荧光性能。此外,Cy3染料通常带有一个活性基团(如NHS ester、maleimide等),以便于与蛋白质、抗体或其他生物分子发生反应。Cy3染料的吸收波长为550nm,发射波长为570nm,发射光谱位于橙红色区域。Cy3染料具有高的荧光量子产率和良好的光稳定性,是一种理想的标记分子。

Cy3因其独特的荧光特性和细胞相容性,被广泛应用于生物医学领域,如免疫荧光、流式细胞术、基因测序、蛋白质研究等。它也被用于制作商业化的荧光探针和染料,如用于细胞追踪和标记的荧光染料-抗体的偶联物。需要注意的是,Cy3染料对光和氧敏感,因此需要在避光和氧气尽可能少的环境中储存和使用。另外,由于Cy3染料具有一定的生物毒性,因此在操作过程中需要采取适当的防护措施。

Invitrogen Cyanine3(Cy3)染料是一种明亮的橙色荧光染料,可使用532nm激发光激发,并使用TRITC(四甲基罗丹明)滤光片组进行可视化。除了免疫细胞化学应用外,Cy3染料还常用于标记核酸。Cy3荧光基团也是亲脂性神经元和长时程DiI细胞示踪试剂的基础,这些试剂将烷基尾部(≥12个碳)附加到核心荧光基团上。Invitrogen Cyanine3 (Cy3) dye is a bright, orange-fluorescent dye that can be excited using the 532 nm laser line and visualized with TRITC (tetramethylrhodamine) filter sets. In addition to immunocytochemistry applications, Cy3 dye is commonly used to label nucleic acids. The Cy3 fluorophore is also the basis for the lipophilic neuronal and long-term DiI cell tracing reagents, which append alkyl tails (≥12 carbons) onto the core fluorophore.

相关产品:LUYOR-3415便携式双波长激发光源、LUYOR-3280GR便携式荧光手电筒、LUV-50A荧光观察眼镜。

光谱与选型

CY3 属花青类染料,激发与发射间隔约 20nm,斯托克斯位移小,因此激发光与发射光容易重叠。观察时眼镜的截止波长必须卡在 550 至 560nm 之间,把激发光挡住;用长波通的红镜(如 LUV-50A)比较合适,若用截止波长偏低的镜子,背景会发亮。

为什么 CY3 用得多

它光稳定性好、抗光漂白、荧光亮度高,既能溶于水也能溶于有机溶剂,兼容性好。分子结构上有共轭环系,荧光性能稳定;通常带 NHS 酯、马来酰亚胺等活性基团,便于与蛋白、抗体偶联,因此广泛用于免疫荧光、流式细胞术、基因测序和蛋白研究。

实操提醒

CY3 与 FITC、GFP 的发射峰相隔较远,可以做双标,但要注意通道串色。做组织切片时,固定与封片剂的自发荧光在绿光波段较强,建议先用未染色切片确认背景水平,再判断信号是否可信。

常见问题

CY3 能用蓝光激发吗?

能激发但效率低,且蓝光会同时激发出更多自发荧光,信噪比差。优先用 532nm 或绿光。

CY3 和 CY5 能一起用吗?

可以。CY5 激发约 650nm、发射约 670nm,与 CY3 间隔足够大,配不同眼镜或滤光片即可分开。

为什么用 CY3 观察时背景很红?

多为激发光未被完全滤掉,或封片剂自发荧光。换截止波长更长的眼镜,并用未染色切片做对照。

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引用本文

上海路阳仪器有限公司. 《CY3染料的激发波长和发射波长是多少?》[EB/OL]. 上海路阳仪器有限公司, 2025-06-13. https://www.luyor.net/jishujieda/CY3.html.

上海路阳仪器有限公司

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