312nm中波紫外灯LEB-280L用于白内障疾病研究
哈尔滨医科大学用 312nm 中波紫外灯 LEB-280L 输出 5 W/m² UVB 研究晶状体上皮细胞损伤。本文讲 UVB 建模的波段选择、辐照度与剂量换算、光谱纯度与照射几何。
核心要点
- 哈尔滨医科大学用 312nm 中波紫外灯 LEB-280L 模拟 UVB,研究不同剂量对晶状体上皮细胞凋亡的影响
- 文献中的照射条件为 312nm、总输出 5 W/m²,属于细胞实验常见的 UVB 剂量区间
- LEB-280L 内置 2 根 8W 312nm 灯管并配滤光片,输出以 UVB 为主,UVA、UVC 成分很少
- 剂量 = 辐照度 × 时间:5 W/m² 照 10 min 约 300 mJ/cm²,照 30 min 约 900 mJ/cm²
- 细胞层面的 UVB 实验对光谱纯度和照射均匀性敏感,杂散 UVA 会让结论失真
白内障的环境病因研究里,UVB 是最常被拿来建模的波段。哈尔滨医科大学发表在 Biomedicine & Pharmacotherapy 的工作,用 312nm 中波紫外灯 LEB-280L 输出不同剂量照射人晶状体上皮细胞,观察褪黑素对铁死亡与衰老通路的干预。本文讲这类实验里最容易被忽略的两件事:光谱纯度和剂量换算。
312nm中波紫外灯LEB-280L用于白内障疾病研究
哈尔滨医科大学发表文献《Melatonin inhibits ferroptosis and delays age-related cataract by regulating SIRT6/p-Nrf2/GPX4 and SIRT6/NCOA4/FTH1 pathways》,文献中的实验使用了美国路阳公司生产的312nm中波紫外灯LEB-280L,使用紫外灯LEB-280L输出不同剂量的紫外线辐照细胞,用LEB-280L模拟阳光中的紫外线,用来研究不同剂量的中波紫外线对细胞凋亡的影响。312nm中波紫外灯LEB-280L内置2根8W 312nm紫外线灯管,并安装了紫外滤光片,能够输出纯正的中波紫外线,没有UVA、UVC紫外线,并可以选购台式支架,满足实验的长时间辐照,具体紫外线灯LEB-280L产品介绍请浏览:《实验室用紫外线灯-LEB 系列手持式中波紫外线灯》。
请注意,操作紫外线灯请务必佩戴专业紫外线防护眼镜!

文献简介:
Introduction
Cataracts are the primary cause of preventable blindness globally. With the ageing of the world's population, the proportion of age-related cataract (ARC) patients will increase in both developed and developing countries. Surgical treatment of cataracts is the most effective method in the clinic. However, there is also a risk of intraoperative and postoperative complications, such as posterior capsule opacification, intraocular inflammation and corneal edema [2]. Among many kinds of environmental stresses, such as ultraviolet (UV) radiation, diabetes, drug intake, and excessive smoking and alcohol consumption, UV radiation is the most important risk factor for ARCs. It has been shown that cortical and posterior subcapsular cataracts can be caused dose-dependently by consistent ocular ultraviolet B (UVB) radiation exposure [4]. The formation of cataracts induced by UVB begins with cumulative oxidative damage to human lens epithelial cells (HLECs). During this process, the modes of cell death include apoptosis, necroptosis and pyroptosis.
Materials
Human lens epithelial cell line B-3 (B-3) was obtained from the American Type Culture Collection (ATCC Cat# CRL-11421, RRID: CVCL_6367), SRA01/04 and human embryonic kidney 293 T cell line (HEK-293 T) were purchased from Chinese Academy of Sciences (Shanghai, China). Foetal bovine serum (FBS) was purchased from Gibco (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA), and Dulbecco's modified Eagle's medium was obtained from VivaCell Shanghai (Shanghai, China). UVB exposure was executed with a UVB radiometer (LUYOR-LEB-280L, USA) with a total output of 5 W/m2 (312 nm). A lux meter was used to test the irradiance of UV radiation. A Cell Counting Kit-8 (CCK-8) was purchased from Merck (Darmstadt, Germany). TRIzol and primers were obtained from Invitrogen (Eugene, Oregon, USA). Primary antibodies and fluorochrome-labeled secondary antibodies were purchased from Abcam (Cambridge, UK) and Proteintech (Chicago, IL, USA). All small molecular inhibitors and activators were obtained from MedChemExpress (Monmouth Junction, NJ, USA) and Cayman Chemical Company (Ann Arbor, MI, USA).
文献地址:https://doi.org/10.1016/j.biopha.2022.114048
文献下载:
1-s2.0-S0753332222014378-main.pdf

为什么用 312nm,而不是 365nm 或 254nm
白内障的流行病学证据指向 UVB(280–315nm):角膜吸收掉大部分 UVC,晶状体则主要承受 UVB 的累积损伤。312nm 位于 UVB 的中段,既在晶状体上皮细胞有明显吸收,又不至于像 254nm 那样被培养液和皿盖强烈吸收、几乎到不了细胞层。
365nm 属于 UVA,穿透更深但单光子能量低,诱发氧化损伤的效率远不如 UVB。做 UVB 建模就必须用 UVB 波段的光源,用 UVA 灯"凑剂量"在机制上说不通。
5 W/m² 怎么换算成实验里的剂量
文献给的是辐照度 5 W/m²,这是功率密度不是剂量。换算成剂量要乘时间:5 W/m² = 0.5 mW/cm²,照射 10 min(600 s)得到 300 mJ/cm²,30 min 得到 900 mJ/cm²。写方法学时两个数都要给,只写辐照度别人无法复现,只写剂量则不知道灯有多强。
实际操作中更稳的做法是固定灯距与辐照度,用定时器控制照射时间,并在每次实验前用辐照计复核一次。灯管老化会让 5 W/m² 变成 4 W/m²,按时间算出来的剂量就偏了两成。
光谱纯度:滤光片不是可选项
普通紫外灯管在 UVB 主峰之外还会有 UVA 与少量 UVC 输出。UVA 的存在会激活另一套氧化应激通路,UVC 则直接被培养液吸收、只造成表面损伤,两者都会让"UVB 剂量-效应"曲线变形。LEB-280L 在灯管前加了滤光片,把 UVA、UVC 压下去,输出的主体是 312nm——这是它能用于机制研究的前提。
判断一台灯是否够"纯",看两处:厂家给的光谱图里 312nm 主峰之外是否有明显旁峰;以及滤光片是否属于耗材、有更换周期。滤片受热老化后漏光增加,外观完全正常。
照射几何:培养皿里的事
- 液层厚度。培养液对 UVB 有吸收,液层越厚到达细胞的光越少。各组液量要一致,通常 1–2mm 为宜。
- 皿盖。塑料皿盖会吸收一部分 UVB,照射时是否开盖必须全组统一,并在方法里写明。
- 距离与均匀性。灯管是线光源,靠近灯管中段的位置辐照度更高。用台式支架固定距离,皿放在灯管正下方居中,必要时轻轻晃动培养板让剂量均一。
- 温度。长时间照射会让培养液升温,超过 30 min 的照射建议在照射间隙回到培养箱平衡,或降低环境温度。
安全与记录
312nm 属于对眼睛和皮肤都有明确伤害的波段,操作时必须戴 UVB 防护眼镜、穿长袖、避免皮肤暴露,照射在关门的暗箱或生物安全柜内完成,门上贴警示。
记录至少包含:灯型号与编号、灯距、照射前实测辐照度、照射时间、是否开盖、累计使用小时数。灯管累计 500–1000 小时后应重新测输出,不足则更换。
常见问题
LEB-280L 和 LEAC-280L 有什么区别?
LEB 系列是 312nm 中波(UVB)灯,用于光生物学与细胞损伤模型;LEAC 系列是 254nm 与 365nm 双波长灯,用于荧光观察、荧光物质检测一类。两者外观相近但灯管和滤光片不同,不能互相替代。
可以直接用日光模拟器做 UVB 实验吗?
日光模拟器覆盖全光谱,适合研究"太阳光整体暴露",但做单一 UVB 机制研究时,UVA 与可见光会引入额外变量。要分离 UVB 的作用,用带滤光片的窄波段 UVB 灯更直接。
怎么确认灯的输出还是 5 W/m²?
用峰值响应在 312nm 附近的 UVB 辐照计,在实验所用灯距处直接测量。不要用 UVA 辐照计或照度计代替——响应曲线不匹配,读数会严重偏离。
照射时间越长剂量越大,有没有上限?
没有统一上限,取决于细胞类型与终点。常见做法是先做时间梯度(如 5、10、20、30 min)找存活率的下降区间,再固定一个造模剂量。超过 1 小时的连续照射要考虑培养液蒸发与温升的干扰。
相关产品与延伸阅读
上海路阳仪器有限公司. 《312nm中波紫外灯LEB-280L用于白内障疾病研究》[EB/OL]. 上海路阳仪器有限公司, 2024-10-10. https://www.luyor.net/paper/312nm-LEB-280L.html.





