青花椒 DsRed2 初筛：LUYOR-3415

发布时间：2026-11-06 作者：上海路阳仪器技术文档组 点击次数：

本篇摘要

2026 年 Scientia Horticulturae 的青花椒遗传转化研究，用 P2A-DsRed2 标记做再生苗初筛：培养约 40 天后，以 LUYOR-3415 便携荧光激发光源观察红色荧光，再对阳性材料做 PCR 与 RT-qPCR 验证。本文还原这一步流程，单列论文未写的波长、观察眼镜与照射条件，并区分论文记录与产品资料。

青花椒（Zanthoxylum armatum）是我国西南重要的木本香料树种，再生周期长、遗传转化体系长期不好建，基因功能研究与分子育种因此受限。Qi 等 2026 年发表于 Scientia Horticulturae 的研究，把 DsRed2 红色荧光报告基因经 P2A 自剪切肽与目标基因串联，先靠便携荧光激发光源对再生组培苗做可视化初筛，再对候选阳性材料做 PCR 与 RT-qPCR 验证。本文只还原与这台设备直接相关的那一段流程，并把论文记录与产品资料分开写。

一、论文的实验方法：荧光初筛放在哪一步

木本植物外植体对抗生素筛选比较敏感，容易出现生长受抑、褐化死亡；论文因此改用可视化报告标记做非破坏性初筛。整套流程里，设备只承担其中一步——把「哪些苗值得拿去做分子验证」先判出来。

1. 载体构建。论文把青花椒目标基因（列出 ZaMBF1c、ZaAGL19、ZaARR24）通过 P2A 自剪切肽与 DsRed2 串联在同一过表达载体上。P2A 在翻译过程中发生核糖体跳跃，目标蛋白与 DsRed2 荧光蛋白各自独立表达，既不让荧光蛋白直接挂在目标蛋白上影响其功能，又保留了「载体是否在细胞中工作」的可见信号。

2. 转化与再生。用农杆菌介导侵染青花椒茎段外植体，经芽诱导、生根培养约 40 天得到再生组培苗；同时设野生型 WT 作阴性对照。这一步决定了后面要面对的是一批数量很大的再生苗，而不是几个样品。

3. DsRed2 荧光初筛（设备点名环节）。论文在这一步使用 LUYOR-3415 便携式荧光激发光源，对再生幼苗观察 DsRed2 红色荧光：阳性株系的茎与新生器官可见特异性红色荧光信号，野生型阴性材料无特异性红色荧光。这是「有 / 无」的现场判断，作用是把大量阴性材料在活体阶段先排除，而不是给荧光定量、也不是给整合结论。

4. 分子验证。把荧光阳性植株取出，充分洗去残留农杆菌后提取 DNA 与 RNA，开展 PCR 鉴定与 RT-qPCR 表达定量，确认目标基因的整合与转录水平。论文把「可视化初筛」与「分子验证」串成两步，前一步缩小样本量，后一步给出确证。

5. 结论的边界。红色荧光说明报告基因表达了，是候选阳性的可见信号；它不能替代 PCR 的整合判断，也不能替代 RT-qPCR 的表达定量。把现场荧光当成「转基因成功」的最终结论，是这类实验里最常见的误读。

引用边界：以下项目论文未写。激发波长与波段组合、设备配置后缀、观察眼镜或发射滤片型号、照射距离与时长、环境光与暗室条件、组培瓶是否开盖、拍照记录方式、荧光强度阈值与阳性判定标准、阳性率、表达倍数与转化效率的具体数值。本文也不转述论文中的具体倍数、阳性率与转化效率数字，开展参照实验请直接查原文方法部分与补充材料。这些参数只能来自本单位工艺卡或产品资料，不能回填成论文里的实验设置。

为什么把「论文未写」单列出来。便携激发光源的波长组合、滤光配件与输出功率都属于产品侧可调项。看到论文写「便携式荧光激发光源」就把产品页的波长、功率、眼镜型号补进方法描述，读者会以为那是论文用过的设置，复现时就会按错误的条件去准备。两处信息各有来源，分开写才不会串味。

二、用到的路阳设备

论文把设备写作 LUYOR-3415 便携式荧光激发光源，出现在「DsRed2 阳性材料初筛」这一步；论文未写具体配置后缀与激发波长，因此不能据此判断所用的是哪一组波段组合。站内对应的产品页是 LUYOR-3415RG 双波长荧光蛋白激发光源——那是产品型号，不是论文里的设备标注，引用时两者不要画等号。

流程与引用边界

产品标称参数（产品资料，非论文实验参数）

项目	本站产品页所列
型号	LUYOR-3415RG 双波长荧光蛋白激发光源
波长组合	365 / 400 / 450 / 485 / 520 nm 中任选两种；标准 RG 组合里，R 组对应 GFP 一类绿色荧光，G 组对应 DsRed、TdTomato 一类红色荧光
功率与光斑	单波长 15 W、总功率 27 W；距灯 150 mm 处照射直径约 180 mm
滤光观察	标配 LUV-50 / LUV-60 观察眼镜，可选拍照滤镜；另可选配支架
输入电压	AC 100–260 V，50 / 60 Hz（产品页未标注电池容量与续航）

选型提示：按产品资料，G 组标称对应 DsRed、TdTomato，与本文的 DsRed2 红色荧光报告系统方向一致；但论文未写所用波段组合，不能反推它就一定用的是 G 组。若实验以 GFP 或 YFP 为主，产品页另列有别的组合，下单时需要明确两种波长。至于是否需要暗室、观察距离多少、戴哪副眼镜，这些属于本单位的观察条件设定，论文未写，产品资料也不能代替。

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三、文献出处

Qi Z, et al. A rapid regeneration and visible-marker-assisted transformation platform supporting gene function studies in Zanthoxylum armatum [J]. Scientia Horticulturae, 2026, 369:115291.

设备点名位置：DsRed2 阳性转基因材料的荧光初筛环节
报告系统：P2A 自剪切肽串联目标基因与 DsRed2；研究同时使用 RUBY 红色可见标记

引用声明：本文的实验流程、材料与判定依据引自该篇公开论文；文中产品参数为设备出厂标称，不等同论文实验设置。本文不转述论文中的具体倍数、阳性率与转化效率数值，开展重复或参照实验请优先查阅论文原文，并配合仪器说明书自行设定观察条件。

四、常见问题

Q1：论文写 LUYOR-3415，站上是 LUYOR-3415RG，是同一台设备吗？

论文只写到系列名 LUYOR-3415，未写配置后缀、激发波长与滤光配件，无法据此确定具体是哪一组波段组合。站内对应的产品页型号是 LUYOR-3415RG 双波长荧光蛋白激发光源（标准 R+G 组合）。引用论文时保留原写法 LUYOR-3415，介绍设备时用产品全称 LUYOR-3415RG；不要把产品页的波长、功率写成论文里用过的设置。

Q2：荧光初筛之后为什么还要做 PCR 和 RT-qPCR？

DsRed2 红色荧光说明报告基因已经在细胞中表达，是「载体是否工作」的可见信号，它可以把候选阳性从大量再生苗里挑出来，但不能直接证明目标基因已整合、转录水平如何。论文的流程正是先用便携激发光源初筛，再对荧光阳性材料做 PCR 鉴定与 RT-qPCR 定量，两步合起来才算确证。现场荧光只做分流，不做定量，也不是最终结论。